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色譜柱的清洗

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瀏覽:- 發(fā)布日期:2024-03-01 10:59:18【

正相色譜柱

1. 用四氫呋喃沖洗

2. 用甲醇沖洗

3. 用四氫呋喃沖洗

4. 用二氯甲烷沖洗

5. 用無苯正己烷沖洗

反相色譜柱

1. HPLC 級水沖洗,在沖洗過程中注入4等分共 200μL DMSO

2. 用甲醇沖洗

3. 用氯仿沖洗

4. 用甲醇沖洗

陰離子交換色譜柱

1. HPLC 級水沖洗

2. 50mM 1M 的適當緩沖液進行梯度沖洗

3. HPLC 級水沖洗

4. 用甲醇沖洗

5. 用氯仿沖洗

陽離子交換色譜柱

1. HPLC級水沖洗,在沖洗過程中注入 4 等分共 200μL DMSO

2. 用四氫呋喃沖洗

蛋白體積排阻色譜柱

從蛋白體積排阻填料中移除污染物有兩種清洗/再生方法

弱保留蛋白

1. 30mL 0.1M 磷酸鹽緩沖液 (pH 3.0) 沖洗

強保留蛋白

2. 100% 水到 100% 乙腈梯度沖洗60分鐘

多孔石墨碳色譜柱

多孔石墨碳有四種清洗或再生方法。使用哪種方法取決于分析物以及對應的流動相

1./堿清洗:用水相比例較高的流動相分析離子化合物時

1.1 反接色譜柱

1.2 50mL 包含 0.1% 三氟乙酸的四氫呋喃:(1:1) 溶液沖洗

1.3 50mL 包含 0.1% 三乙胺或氫氧化鈉的四氫呋喃:(1:1) 沖洗

1.4 50mL 包含 0.1% 三氟乙酸的四氫呋喃:(1:1) 溶液沖洗

1.5 70 倍柱體積的 THF 沖洗

1.6 用甲醇/(95:5) 沖洗以重新平衡

1.7 重新倒轉(zhuǎn)色譜柱方向

2.強有機溶劑清洗

用水相比例較高的流動相分析極性和/或離子化化合物時

2.1 50mL 丙酮沖洗

2.2 120mL 二丁醚沖洗

2.3 50mL 丙酮沖洗

2.4 用水溶液流動相沖洗直到達到平衡

賽默飛色譜柱

3.正相模式的清洗

適用于使用正相流動相進行分析的應用。

3.1 50mL 二氯甲烷沖洗

3.2 50mL 甲醇沖洗

3.3 50mL 水沖洗

3.4 50mL 0.1M 鹽酸沖洗

3.5 50mL 水沖洗

3.6 50mL 甲醇沖洗

3.7 50mL 二氯甲烷沖洗

3.8 用流動相沖洗直到達到平衡


4. 移除 TFA DEA

TFA DEA可能吸附于多孔石墨碳表面;在流動相中使用這些添加劑后,應對色譜柱進行再生以確保始終實現(xiàn) Hypercarb的原始選擇性和最佳性能。

再生程序如下:

4.1 移除 TFA:用 70 倍柱體積的 THF 沖洗。

4.2 移除 DEA:將柱溫設為75℃,然后用120倍柱體積的ACN 沖洗。

如果你還有任何關(guān)于色譜柱的問題或者有色譜柱購買的需求,歡迎聯(lián)系集思儀器,免費咨詢熱線:027-85518521,400-0027-510,17720504339。

【本文標簽】:色譜柱 實驗儀器 集思儀器
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