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高效液相色譜儀引用了氣相色譜的理論,在技術上,流動相改為高壓輸送,色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經典液相色譜,同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續(xù)檢測。
1.高壓:液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~ 350x 105Pa。
2.高速:流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,-般可達1~10m/mino高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多,一般少于1h。
3.高效:近來研究出許多新型固定相,使分離效率大大提高。
4.高靈敏度:高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測器,進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外,用樣童小,-般幾個微升。
5.適應范圍寬:氣相色譜法與高效液相色譜法的比較:氣相色譜法雖具有分離能力好,靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但是受技術條件的限制,沸點太高的物質或熱穩(wěn)定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析。
而高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子里大(大于400以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數(shù)的75% ~ 80% )原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色譜分析的約占70~ 80%。
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