移液器分類
01按照吸液方式的物理原理分類
氣體活塞式移液器(Air-cushion)
工作原理:通過(guò)彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng),推動(dòng)活塞,排除部分空氣,利用大氣壓吸入液體,再由活塞推動(dòng)空氣排除液體適用于常規(guī)溶液移液,吸頭為一次性使用。
外置活塞式移液器(Positive-displacement)
工作原理:通過(guò)吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運(yùn)動(dòng)移取和打出液體,活塞和液體直接接觸,沒(méi)有空氣柱,適用于密度、黏度、與水不同的液體,如易揮發(fā)溶液、粘稠液體、密度大于2.0g/mL的液體等,活塞和吸頭為一次性使用。
02按照通道數(shù)量分類
單通道移液器
多通道移液器
移液器構(gòu)造
1. 控制按鈕
2. 體積調(diào)節(jié)按鈕
3. 吸頭脫卸按鈕
4. 體積顯示窗口
5. 密度調(diào)節(jié)孔
6. 密度調(diào)節(jié)窗口
7. 標(biāo)記區(qū)
8. 套筒
9. 彈性吸嘴
10. 吸頭
移液器使用
一個(gè)完整的移液循環(huán),包括裝吸頭-量程設(shè)定-預(yù)洗吸頭-吸液-放液-卸去吸頭等六個(gè)步驟。
00選擇合適的移液器
移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作,但在10%量程處操作對(duì)于移液技巧要求高,故推薦在20(>20)-100%量程范圍內(nèi)操作
01裝吸頭
單通道
正確操作:移液器套柄輕輕下壓,需要時(shí)小幅度旋轉(zhuǎn)即可;
錯(cuò)誤操作:用力敲擊吸頭,此方法會(huì)導(dǎo)致吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
多通道
將移液器的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)吸頭,傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可。
槍頭卡緊的標(biāo)志:略超過(guò)O型環(huán),且可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
02量程設(shè)定
從大體積調(diào)為小體積
按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;
從小體積調(diào)為大體積
可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過(guò)所需量程1/3圈處,再回調(diào)至所需量程。
03預(yù)洗吸頭
吸液前,用同一溶液先對(duì)吸頭進(jìn)行潤(rùn)濕3次(吸液排液三次),通過(guò)潤(rùn)洗,吸頭內(nèi)壁會(huì)吸附一層溶液,使吸頭內(nèi)壁表面吸附達(dá)到平衡,同時(shí),對(duì)于一些高飽和蒸汽壓的溶液,預(yù)吸也可以降低蒸汽壓對(duì)移液精度的影響。
注意:高溫或者低溫液體請(qǐng)不要潤(rùn)洗!
04吸液
吸液方式的選擇
正向吸液法:
適用于一般液體;
用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn),然后慢慢松開(kāi)按鈕回原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體,稍停片刻繼續(xù)按下按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體,最后松開(kāi)按鈕。
反向吸液法:
適用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體;
吸取液體時(shí)先按下按鈕至第二停點(diǎn),慢慢松開(kāi)按鈕至原點(diǎn)。將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體,保持按鈕位于第一停點(diǎn),取下有殘留液體的吸液嘴,棄之。
吸頭浸入角度 :吸液時(shí)盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過(guò)20°。
吸頭浸入深度:
P10uL:小于或等于1毫米;
P20uL、P100uL、P200uL:小于或等于2毫米;
P1000uL:小于或等于3毫米;
P5mL、P10mL:小于或等于4毫米。
吸頭浸入時(shí)間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開(kāi)。
吸液速度 :勻速連貫移液,控制好移液速度。
05排液及吹液
吸頭緊貼容器壁,先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。
06 卸去吸頭
往下按壓吸頭脫卸按鈕,即可卸下吸頭。
吸液排液過(guò)程中注意事項(xiàng)
溫度:移液器、吸頭、溶液三者溫度一致
深度:吸頭浸入液面的深度
速度:慢吸慢放
濕度:將吸頭預(yù)吸3次
適度:吸排液時(shí)的停頓時(shí)間
角度:垂直吸液
配合度:排液時(shí)打第二檔的速度與吸嘴離開(kāi)液面的時(shí)間
移液器的正確放置
使用完畢,將移液器量程調(diào)到最大,使移液器內(nèi)部彈簧恢復(fù)原形,延長(zhǎng)移液器壽命,并將其豎直掛在移液器架上。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí),切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
注意事項(xiàng)
1.移液器使用完畢后,把移液器量程調(diào)至最大值。
2.當(dāng)移液器吸頭里有液體時(shí)切勿將移液器水平或倒置放置,防液體流入移液器腐蝕移液器,應(yīng)將移液器掛在移液器架上。
3.如液體不小心進(jìn)入移液器內(nèi)應(yīng)及時(shí)清除污染物。
4.加液后若有液體滴出,說(shuō)明移液器漏氣或者吸頭沒(méi)有插緊,建議把吸頭插緊,若仍舊滴液,建議更換移液器。
5.需要高溫消毒的移液器應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后再行處理。
6.吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開(kāi)拇指,絕不允許突然松開(kāi),以防將溶液吸入過(guò)快而沖入移液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
7.吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí),吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層“液膜”,第二次吸取時(shí)的體積會(huì)大于第一次的體積。
8.卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放,以免產(chǎn)生交叉污染。
9.選擇合適量程范圍的移液器,切勿用大量程的移液器移取小體積樣品。
10.定期進(jìn)行校正保養(yǎng),確保移液精密度。
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