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色譜柱的分類

2019-08-29 16:57:43 

色譜柱可分正相模式色譜柱反相模式色譜柱親水模式柱

正相模式色譜柱:采用極性固定相(如乙二醇、氨基與腈基等鍵合相);常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。

反相模式色譜柱:一般用非極性固定相,以硅膠為基質(zhì)鍵合不同的基團(tuán)(如C18、C8);適用于分離非極性和極性較弱的化合物。反相色譜(RPC)在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用最多,據(jù)統(tǒng)計(jì)它占整個(gè)HPLC應(yīng)用的80%左右。由于超臨界色譜的崛起,一些過去用正相色譜的實(shí)驗(yàn)逐漸被超臨界色譜所代替,所以反相色譜柱的應(yīng)用將會(huì)更加廣泛。隨著色譜柱填料的快速發(fā)展,某些無機(jī)樣品或易解離樣品的分析也可用反相色譜法。為控制樣品在分析過程的解離,常用緩沖鹽控制流動(dòng)相的pH 值。硅膠基質(zhì)鍵合相(C8和C18)色譜柱使用的pH 值通常為2.5~7.5(2~8),太高的pH 值會(huì)使硅膠溶解,太低的pH 值會(huì)使鍵合的烷基脫落。近年來技術(shù)的更新,利用包被、空間位阻、雜化顆粒等新技術(shù),已經(jīng)可以使硅膠基質(zhì)的色譜柱使用范圍擴(kuò)大到pH 為1~12,流動(dòng)相為較強(qiáng)酸性或堿性時(shí),可選擇寬pH 值的色譜柱。

親水(HILIC)模式:HILIC不同于反相色譜技術(shù),流動(dòng)相為反相色譜的流動(dòng)相,它提供了相對(duì)于反相的互補(bǔ)選擇性,通??杀A魝鹘y(tǒng)反相色譜方法無法保留的高極性化合物。需要注意的是HILIC模式中硅膠基質(zhì)無鍵合相的色譜柱,流動(dòng)相pH 適用范圍。

色譜柱

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