如果流動相均由高效液相色譜級溶劑組成,流動相沒有必要過濾。這是因為高效液相色譜級的有機溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經(jīng)過了0.2μm微孔濾膜過濾。
同樣,無論你是買的高效液相色譜儀級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水,最后一步也是通過0.2μm微孔濾膜,然而,如果有任何一種緩沖液中加入了固體物,例如,磷酸鹽,流動相過濾將是必要的一個步驟。雖然緩沖鹽可能是可溶解的、高純的,但它還是可能含有顆粒物質,例如在蓋試劑瓶的塑料內蓋時,塑料瓶蓋子與瓶口邊緣擠壓就會產(chǎn)生塑料顆粒。在這種情況下,添加的一種固體物可能完全溶解了,但是少量雜質顆粒存在于流動相中成為殘渣。
流動相通過0.45μm微孔濾膜過濾對于從流動相中除去所有顆粒物是一個有效方法。0.2μm微孔濾膜也可以用,但是在高效液相色譜儀中它們就這個應用而言并不比0.45μm微孔濾膜更有效,而且它的過濾速度會更慢,特別是當實驗室使用的試劑和水的質量不太好時。
建議實驗室在編寫制定他們流動相制備標準操作程序(SOPs)時規(guī)定,可以借鑒國際上同類實驗室的規(guī)定,即:流動相制備僅采用高效液相色譜儀級液體時不需要過濾,反之所有流動相組成在使用前必須過濾。在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端入口采用下沉式過濾器(常見材質有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個過濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質,所以,它不能取代流動相過濾步驟,但是它能除去系統(tǒng)中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。
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