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熒光分析可以根據(jù)物質(zhì)光致發(fā)光產(chǎn)生的熒光特性和強度,對物質(zhì)進行定性和定量分析。目前,它還被廣泛用于表征體系的物理化學性質(zhì)和變化,如生物大分子的構(gòu)象和性質(zhì)。熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析??筛鶕?jù)樣品選擇石英反應杯(液體樣品)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)。
熒光分析的優(yōu)點:
(1)高靈敏度
(2)強選擇性
(3)小樣本量
(4)提供更多的物理參數(shù)
(5)易于使用。但是,它也有一些缺點,如應用范圍不夠,對環(huán)境敏感(干擾因素較多)。
1.定性分析
不同結(jié)構(gòu)的熒光化合物具有特征的激發(fā)和發(fā)射光譜。因此,可以將熒光物質(zhì)的激發(fā)和發(fā)射光譜的形狀和峰位與標準溶液的光譜進行比較,從而達到定性分析的目的。
2.定量分析
在低濃度下,溶液的熒光強度與熒光物質(zhì)的濃度成正比:F=KC。式中,f為熒光強度,C為熒光物質(zhì)濃度,K為比例系數(shù)。這是熒光光譜定量分析的基礎。
熒光光譜在生物領域的應用:
熒光光譜法主要用于生物樣品中某些組分含量的測定,生物技術和免疫技術的分析,如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的測定,以及DNA、抗體、抗原等的研究。各種熒光探針用于分析和檢測。主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針。納米技術的興起開辟了熒光分析的新領域。納米材料具有良好的熒光、寬激發(fā)、窄發(fā)射等優(yōu)良的光譜特性,是熒光分析領域研究人員十分感興趣的重要研究對象。
熒光光譜在藥物分析中的應用:
在藥物分析領域,熒光光譜可用于藥物活性成分的鑒定、藥代動力學研究、臨床藥理療效分析等。藥物熒光分析可分為直接熒光分析、間接熒光分析和納米熒光分析。常規(guī)熒光分析首次用于分析抗瘧藥物奎寧。隨著熒光分析技術的發(fā)展,它被廣泛應用于抗生素、鎮(zhèn)痛藥、鎮(zhèn)靜劑和止血劑的分析。
熒光光譜在食品中的應用:
熒光分析主要應用于該領域,分析檢測礦物質(zhì)和金屬元素、氨基酸、維生素、真菌污染、添加劑、防腐劑、食品包裝中的有害物質(zhì)、農(nóng)藥殘留等,結(jié)合HPLC、TLC、FIA等技術,可以提高食品中各種物質(zhì)的檢測方向。
熒光光譜在環(huán)境分析中的應用:
隨著有機化工、石油化工、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展,以及農(nóng)藥(農(nóng)藥、除草劑等)的廣泛使用,有機化合物的危害越來越大,對環(huán)境的污染越來越嚴重。熒光分析可用于檢測環(huán)境中各種物質(zhì)的含量,主要用于水、礦石和土壤。
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