（一）物理消毒滅菌法 利用物理因子殺滅微生物的方法。包括熱力消毒滅菌、輻射消毒、空氣凈化、超聲波消毒和微波消毒等。

1．熱力消毒滅菌 高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和酶變性或凝固（結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致功能喪失），新陳代謝受到障礙而死亡，從而達(dá)到消毒與滅菌的目的。在消毒中，熱可分為濕熱與干熱兩大類。

干熱消毒滅菌

干熱是指相對(duì)濕度在20％以下的高熱。干熱消毒滅菌是由空氣導(dǎo)熱，傳熱效果較慢。一般繁殖體在干熱80－100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死，芽胞需160－170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死。

（1）燃燒法 是一種簡單、迅速、徹底的滅菌方法，因?qū)ξ锲返钠茐男源?，故?yīng)用范圍有限。

燒灼法：一些耐高溫的器械（金屬、搪瓷類），在急用或無條件用其他方法消毒時(shí)可采用此法。將器械放在火焰上燒灼1－2分鐘。若為搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)容器，使乙醇分布均勻，點(diǎn)火燃燒至熄滅約1－2分鐘。采集作細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本時(shí)，在留取標(biāo)本前后（即啟蓋后，閉蓋前）都應(yīng)將試管（瓶）口和蓋子置于火焰上燒灼，來回旋轉(zhuǎn)2－3次。

燃燒時(shí)要注意安全，須遠(yuǎn)離易燃易爆物品，如氧氣、汽油、乙醚等。燃燒過程不得添加乙醇，以免引起火焰上竄而致灼傷或火災(zāi)。銳利刀剪為保護(hù)刀鋒，不宜用燃燒滅菌法。

焚燒：某些特殊感染，如破傷風(fēng)、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料，以及其它已污染且無保留價(jià)值的物品，如污紙、垃圾等，應(yīng)放入焚燒爐內(nèi)焚燒，使之炭化。

（2）干烤法

電熱培養(yǎng)箱：利用培養(yǎng)箱的熱空氣消毒滅菌。培養(yǎng)箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對(duì)流，產(chǎn)生均一效應(yīng)的熱空氣直接穿透物體。一般繁殖體在干熱80－100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死，芽胞、病毒需160－170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死。熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑等。滅菌后待箱內(nèi)溫度降至50－40℃以下才能開啟柜門，以防炸裂。

微波消毒：微波是一種高頻電磁波，其殺菌的作用原理，一為熱效應(yīng)，所及之處產(chǎn)生分子內(nèi)部劇烈運(yùn)動(dòng)，使物體里外濕度迅速升高；一為綜合效應(yīng)，諸如化學(xué)效應(yīng)、電磁共振效應(yīng)和場致力效應(yīng)。目前已廣泛應(yīng)用于食品、藥品的消毒，用微波滅菌手術(shù)器械包、微生物實(shí)驗(yàn)室用品等亦有報(bào)告。若物品先經(jīng)1％過氧乙酸或0.5％新潔爾滅濕化處理后，可起協(xié)同殺菌作用，照射2分鐘，可使殺芽胞率由98.81％增加到99.98％－99.99％。

微波對(duì)人體有一定危害性，其熱效應(yīng)可損傷睪丸、眼睛晶狀體等，長時(shí)間照射還可致神經(jīng)功能紊亂。使用時(shí)可設(shè)置不透微波的金屬屏障或戴特制防護(hù)眼境等。

濕熱消毒滅菌

濕熱消毒滅菌是由空氣和水蒸氣導(dǎo)熱，傳熱快，穿透力強(qiáng)，濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時(shí)間短。

（1）煮沸法 將水煮沸至100℃，保持5－10分鐘可殺滅繁殖體，保持1－3小時(shí)可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1％－2％濃度時(shí)，沸點(diǎn)可達(dá)105℃，能增強(qiáng)殺菌作用，還可去污防銹。在高原地區(qū)氣壓低、沸點(diǎn)低的情況下，要延長消毒時(shí)間（海拔每增高300m，需延長消毒時(shí)間2分鐘）。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。

煮沸前物品涮洗干凈，打開軸節(jié)或蓋子，將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊，以確保物品各面與水接觸。銳利、細(xì)小、易損物品用紗布包裹，以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮；金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時(shí)間均從水沸后開始計(jì)時(shí)。若中途再加入物品，則重新計(jì)時(shí)，消毒后及時(shí)取出物品，保持其無菌狀態(tài)。

（2）高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅菌器裝置嚴(yán)密，輸入蒸汽不外逸，溫度隨蒸汽壓力增高而升高，當(dāng)壓力增至103－206kPa時(shí)，濕度可達(dá)121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌，為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓，不怕潮濕的物品，如敷料、手術(shù)器械、藥品、細(xì)菌培養(yǎng)基等。

潛熱是指當(dāng)lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時(shí)，釋放出2255.2J的熱量。

高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問題是為熱的傳導(dǎo)提供良好條件，而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因?yàn)槔淇諝鈱?dǎo)熱性差，阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品，并且還可減低蒸汽分壓使之不能達(dá)到應(yīng)有的溫度。

手提式高壓蒸汽滅菌器：為金屬圓筒，分為二層，隔層內(nèi)盛水，有蓋，可以旋緊，加熱后產(chǎn)生蒸汽。鍋外有壓力表，當(dāng)蒸汽壓力升高時(shí)，溫度也隨之相應(yīng)升高。該滅菌器體積小，可自發(fā)蒸汽，便于攜帶。

操作方法如下：在滅菌器中盛水3000ml；將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內(nèi)；將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內(nèi)壁的的方管中；蓋好蓋子，擰緊元寶螺絲，勿使漏氣；鍋下加熱，打開排氣活門，放出冷空氣（一般在水沸后排氣10－15分鐘左右），關(guān)閉放氣活門，使壓力逐漸上升至103kPa，溫度達(dá)121.3℃,維持20分鐘后，排氣至“0”時(shí)，慢慢打開蓋子。如果突然開蓋，冷空氣大量進(jìn)入，蒸汽凝成水滴，使物品潮濕，且玻璃類易發(fā)生爆裂。后再關(guān)閉放氣開關(guān)，待夾層壓力表達(dá)到滅菌所需壓力時(shí)（約10分鐘后），將蒸汽控制閥移至“消毒”位置，使蒸汽進(jìn)入柜室，柜室內(nèi)的冷空氣及冷凝水可由柜室阻氣器排出，待柜室的壓力升到103－137kPa，溫度達(dá)121.3～126.2℃時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)壓力調(diào)節(jié)閥，使壓力與溫度保持恒定。維持30分鐘后，將蒸汽控制閥移至“排氣”位置，排氣畢，將蒸汽控制閥移至“干燥”位置；物品干燥后，將蒸氣控制閥移至“關(guān)閉”位置，待壓力指針到“0”位置和熱空氣排盡后，才能打開柜門，取出物品；關(guān)緊進(jìn)氣閥。

臥式高壓蒸汽滅菌器：其結(jié)構(gòu)原理同手提式高壓蒸汽滅菌器，因其體積大，一次可滅菌大量物品。操作人員須經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)，合格后方能上崗。

預(yù)真空式高壓蒸汽滅菌器：在通入蒸汽前有一預(yù)處理階段，即柜室內(nèi)抽負(fù)壓至2.6kPa（空氣排除約98％），所以，預(yù)真空高壓蒸汽滅菌器除有下排氣式所具備的滅菌系統(tǒng)、蒸汽輸送系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、安全系統(tǒng)和儀表監(jiān)測指示系統(tǒng)外，增加抽負(fù)壓系統(tǒng)和空氣過濾系統(tǒng)。機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)由電腦控制。

紫外線消毒

在室溫20℃～25℃時(shí)，220V30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換，適當(dāng)數(shù)量的紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線消毒時(shí)，無菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。在無人條件下，可采取紫外線消毒，作用時(shí)間應(yīng)30min，室內(nèi)濕度20%或40%、相對(duì)濕度大于60%時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長照射時(shí)間。用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線的直接照射，且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。

臭氧消毒

封閉無菌室內(nèi)，無人條件下，采用20mg/m3濃度的臭氧，作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)作業(yè)。

（二）化學(xué)試劑消毒

（1）甲醛消毒：按照甲醛（40%）10毫升／立方米、高錳酸鉀5克／立方米計(jì)算用量。不同情況下，用量有所不同，但比例為2：1。盛藥容器要大、耐熱、耐腐蝕：一般用陶瓷或玻璃容器，因?yàn)楦咤i酸鉀和甲醛都具有腐蝕性，且混合后反應(yīng)劇烈，釋放熱量。房間要密閉：這樣熏蒸效果才會(huì)好。容器應(yīng)盡量靠近門，以便操作人員迅速撤離；先將溫水倒入容器內(nèi)，后加入高錳酸鉀，攪拌均勻；再加入甲醛；加入甲醛后人立即離開，密閉房間。注意順序：是將甲醛倒入高錳酸鉀溶液內(nèi)。消毒時(shí)間一般為20-30分鐘。消毒后要打開門窗通風(fēng)換氣。

這里說的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福爾馬林，一般包裝上寫的是37%。

缺點(diǎn)：甲醛對(duì)人體危害太大了，一般不推薦這種方法。

可以考慮用40%乳酸熏蒸，效果很不錯(cuò)的。

（2）乳酸重蒸法消毒：室內(nèi)溫度22℃，濕度75%～90%，按0.6g/m3乳酸量共用9.6g進(jìn)行室內(nèi)熏蒸，使蒸汽彌散全室，密閉門窗1h。

附表：常見三種消毒方法的結(jié)果比較

注：Ⅰ乳酸熏蒸法；Ⅱ紫外線滅菌法；Ⅲ臭氧消毒法。

結(jié)果作方差分析，乳酸熏蒸法、臭氧消毒法與紫外線滅菌法差異均有顯著性（P＜0.05），乳酸熏蒸法與臭氧消毒法差異無顯著性（P＞0.05）。

還有更多關(guān)于消毒箱的問題，歡迎聯(lián)系集思。

武漢集思儀器設(shè)備有限公司致力于打造世界先進(jìn)水平又適合國內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，致力于為您度身定制系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室整體解決方案，是華中地區(qū)規(guī)模型實(shí)驗(yàn)室服務(wù)一站式供應(yīng)商，已為超過5000個(gè)國內(nèi)知名企事業(yè)單位提供專業(yè)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，咨詢熱線：027-85518521，400-0027-510，17720504339。