熱門關(guān)鍵詞: 實驗室儀器設(shè)備默克化學試劑分析天平實驗室分析儀器
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高壓蒸汽滅菌鍋的正確使用解惑
高壓蒸汽滅菌,用高溫加高壓滅菌,不僅可殺死一般的細菌、真菌等微生物,對芽孢、孢子也有殺滅效果,是最可靠、應用最普遍的物理滅菌法。在選修1教材技術(shù)實踐中多次使用。
問題:高壓蒸汽滅菌如何操作?需要注意哪些事項呢?
01 高壓蒸汽滅菌結(jié)構(gòu)和原理
高壓蒸汽滅菌器是利用飽和壓力蒸汽對物品進行迅速而可靠地消毒滅菌的設(shè)備,適用于醫(yī)療衛(wèi)生、科研、農(nóng)業(yè)等單位??蓪︶t(yī)療器械、敷料、玻璃器皿、溶液培養(yǎng)基等進行消毒滅菌。
高壓蒸汽滅菌器按照樣式和大小分為手提式高壓蒸汽滅菌器、立式高壓蒸汽滅菌器、臥式高壓蒸汽滅菌器等。手提式高壓蒸汽滅菌器的容積通常為18L、24L、30L。立式高壓蒸汽滅菌器的容積范圍通常為30L-200L,進一步又可分為手輪型、翻蓋型、智能型。智能型又分為 標準配置型、蒸汽內(nèi)排型、真空干燥型。臥式高壓蒸汽滅菌器通常為大型臥式高壓滅菌鍋。
高壓蒸汽滅菌器由滅菌室、控制系統(tǒng)、過壓保護裝置等組成。
滅菌的原理是利用高溫飽和水蒸汽在一定時間內(nèi)可使微生物的蛋白質(zhì)變性導致微生物死亡的功效,達到對耐濕耐熱物品進行滅菌的目的。
溫度上升的原理是由于在密閉的蒸鍋內(nèi)蒸汽不能外溢,隨著壓力不斷上升水的沸點也會不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加,在0.1MPa壓力下鍋內(nèi)溫度可達121℃。在此蒸汽溫度下可以很快殺死各種細菌。
02滅菌操作程序
1.滅菌物品的包裝和容器要合適
首先將內(nèi)層滅菌桶取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。需要滅菌的物品按需要分類包裝,物品包裝用線繩捆扎,以不松動散開為宜,不宜過緊,培養(yǎng)皿等器皿需要用牛皮紙包扎。
2.滅菌物品裝放應合理
滅菌鍋內(nèi)物品不能過擠,不能超過鍋內(nèi)容量。盡量將同類物品裝在同一鍋內(nèi)滅菌。若有不同類物品裝放在一起,應以難達到滅菌物品的所需溫度和時間為準。物品裝放時,上下左右均應交叉錯開,留出縫隙,使蒸汽容易穿透。大滅菌包應立著放上層,小包放下層,布類和金屬類物品同時滅菌時,應將金屬類物品包放在下層,使兩者受熱基本一致,并防止金屬物品滅菌中產(chǎn)生的冷凝水弄濕包布。
加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。
3.排盡冷空氣
打開電源加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。使用高壓蒸汽滅菌器時,最關(guān)鍵的是將鍋內(nèi)空氣排盡。如鍋內(nèi)有空氣,則氣壓針所指的壓強不是飽和蒸汽產(chǎn)生的壓強。相同的壓強,混有空氣的蒸汽其溫度低于飽和蒸汽所產(chǎn)生的溫度。因此完全排除鍋內(nèi)空氣使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,滅菌才能徹底。
常用方法是:關(guān)閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時,打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,壓力表上升達到0.1MPa時,開始計時,維持壓力到指定的時間。
4.合理計算滅菌時間
待冷空氣完全排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。
滅菌時間包括:穿透時間,從鍋內(nèi)達到滅菌溫度開始到鍋內(nèi)最難達到的部位也達到此溫度所需要的時間;維持時間,即殺滅微生物所需要的時間,一般以殺滅嗜熱脂肪桿菌芽胞所需時間來表示;安全時間,為使滅菌得到確切保證所需要增加的時間,一般為熱死亡時間的一半,其長短視滅菌物品而定。
對易導熱的金屬器材的滅菌,不需要安全時間。在滅菌時間內(nèi),要注意觀察壓力表,以保持規(guī)定的壓力,維持到滅菌時間為止。在滅菌過程中,如有壓力、溫度下降,應重新升溫升壓,重新計時。
5.開蓋操作
達到滅菌時間后即可切斷電源,一般當壓力表的壓力降至0之后,再打開排氣閥。有時,在壓力降到0.05MPa,可緩慢放出蒸汽,注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當壓力降到零后才能開蓋,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。取出培養(yǎng)基擺在平臺上以待冷凝,不可以長久不取出,否則容易引起培養(yǎng)基成分變化以至無法制作斜面培養(yǎng)基。
如果因為久不放氣導致鍋爐內(nèi)產(chǎn)生負壓、蓋子打不開,可以將放氣閥打開,讓空氣進入,內(nèi)外壓力平衡后蓋子就可以打開了。取無菌物品時,要嚴格無菌操作。同時應分類放置,順序發(fā)放取用。
6.高壓滅菌時間控制
如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長滅菌時間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴格遵守保壓時間,既要保壓徹底,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長時間。
另外,含有鹽分的液體漏出或溢出時,一定要及時擦干凈,沿著蓋子的密封圈要徹底擦干,否則會腐蝕容器和管道。 不要在爆炸性氣體附近使用儀器。
03若干問題解疑
1.哪些物品可以高壓蒸汽滅菌?
不是所有的物品都可以高壓蒸汽滅菌的,例如,有破壞性材料和含堿金屬成份的物質(zhì),否則會導致爆炸、腐蝕內(nèi)膽和內(nèi)部管道或破壞墊圈。
2.選擇121度有什么好處或者原理嗎?
其實,不同的產(chǎn)品對溫度的承受和要求是不一樣的,大多數(shù)食品都是選擇121°來經(jīng)過15min以上來達到滅菌,以便于長期保存的目的。這個溫度下能使所有的微生物殺死,包括芽孢休眠體。
但是一些食品也可能選擇其他溫度來殺菌,比如牛奶就是巴氏殺菌,溫度只有60多度。因為溫度會影響產(chǎn)品營養(yǎng)和風味,這個溫度是對產(chǎn)品影響最小且達到的效果最好的一個選擇。
當然不只是和溫度有關(guān),還有壓力及時間等要求,必須這3個保證才能達到滅菌的最佳效果。
3.為什么滅菌偏偏選擇121度?而不是120度或者122度呢?
這個溫度是在1Kg/cm2壓力下,通過物理公式克拉伯龍方程(PV=nRT)計算得到的。
4.標準大氣壓也要101.3KPa,怎么會設(shè)定在100KPa ,比標準大氣壓還要小的壓力?
設(shè)定的1Kg/cm2壓力,相當于100KPa,表面上看起來比標準大氣壓也小,按照物理學原理,其實是比大氣壓大100KPa,也就是說,這是壓力差。計算的結(jié)果正好是121度。
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