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高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)剖析

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瀏覽:- 發(fā)布日期:2023-12-25 11:00:33【

、高壓泵

HPLC使用的色譜柱是很細(xì)的(16mm),所用固定相的粒度也非常?。◣?/span>μm到幾十μm),所以流動(dòng)相在柱中流動(dòng)受到的阻力很大,在常壓下,流動(dòng)相流速十分緩慢,柱效低且費(fèi)時(shí)。為了達(dá)到快速、高效分離,必須給流動(dòng)相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動(dòng)速度。為此,須用高壓泵進(jìn)行高壓輸液。高壓、高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一。

、梯度洗提

類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不可缺少的部分。

梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過(guò)程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,通過(guò)載液中極性的變化來(lái)改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。

液相色譜儀

、進(jìn)樣裝置

1)注射器進(jìn)樣裝置:進(jìn)樣所用微量注射器及進(jìn)樣方式與GC法一樣。進(jìn)樣壓力<150×105Pa,當(dāng)進(jìn)樣壓力>150×105Pa時(shí),必須采用停流進(jìn)樣。

2)高壓定量進(jìn)樣閥:與GC法用的流通法相似,能在高壓下進(jìn)樣。

4、色譜柱

色譜柱是色譜儀最重要的部件(心臟)。通常用后壁玻璃管或內(nèi)壁拋光的不銹鋼管制作的,對(duì)于一些有腐蝕性的樣品且要求耐高壓時(shí),可用銅管、鋁管或聚四氟乙烯管。

柱子內(nèi)徑一般為16mm。常用的標(biāo)準(zhǔn)柱型是內(nèi)徑為4.63.9mm ,長(zhǎng)度為1530cm的直形不銹鋼柱。填料顆粒度510μm ,柱效以理論塔板數(shù)計(jì)大約700010000 。

發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。

5、檢測(cè)器

主要包括紫外光度檢測(cè)器、光電二極管陣列檢測(cè)器熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器電導(dǎo)檢測(cè)器。

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