高效液相色譜儀分析中保留時(shí)間不重現(xiàn)有保留時(shí)間漂移和保留時(shí)間波動(dòng)兩種情況。前者是指保留時(shí)間僅沿單方向發(fā)生變化，后者指保留時(shí)間無(wú)固定規(guī)律的波動(dòng)。保留時(shí)間漂移的原因有色譜柱平衡、固定相流失、色譜柱污染、流動(dòng)相組成變化、流動(dòng)相污染和疏水坍塌等。事實(shí)上，保留時(shí)間漂移往往是由色譜柱老化引起的。

一、色譜柱平衡：

高效液相色譜中保留時(shí)間發(fā)生漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動(dòng)相完全平衡。通常平衡需要10～20倍柱體積的流動(dòng)相，但如果在流動(dòng)相中加入少量添加劑（如離子對(duì)試劑），則需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間平衡色譜柱。

二、固定相流失：

固定相的穩(wěn)定性都是有限的，即使在推薦的pH值范圍內(nèi)使用，固定相也會(huì)慢慢水解。例如硅膠基質(zhì)在pH = 4時(shí)水解穩(wěn)定性最好。

固定相水解速度與流動(dòng)相類型和配體有關(guān)。雙官能團(tuán)配體和三官能團(tuán)配體比單官能團(tuán)配體的鍵合相穩(wěn)定，長(zhǎng)鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩(wěn)定，烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。

經(jīng)常清洗色譜柱也會(huì)加速固定相水解。

三、色譜柱污染：

高效液相色譜柱是非常有效的吸附性過(guò)濾器，它可以過(guò)濾并吸附流動(dòng)相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可以是流動(dòng)相本身、流動(dòng)相容器、連接管、泵、進(jìn)樣器、密封墊和樣品等。通常通過(guò)實(shí)驗(yàn)可判斷污染來(lái)源。

如果樣品中有在色譜柱上保留很強(qiáng)的組分，這些組分可能是使保留時(shí)間漂移的潛在根源，根源通常是樣品基質(zhì)，可以通過(guò)固相萃取等樣品前處理除去樣品基質(zhì)。通常樣品中強(qiáng)保留組分的分子量較高，保留時(shí)間漂移的同時(shí)或其后，反壓會(huì)增加。

四、流動(dòng)相組成變化：

流動(dòng)相組成的緩慢變化也是保留時(shí)間漂移的常見(jiàn)原因，如流動(dòng)相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)和循環(huán)使用流動(dòng)相等。

五、流動(dòng)相污染：

溶于流動(dòng)相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上，從而造成保留時(shí)間漂移。

注意：水是很容易污染的流動(dòng)相成分。

六、疏水坍塌：

當(dāng)小孔徑和端基封口良好的反相色譜柱使用接近100%的水為流動(dòng)相時(shí)，有時(shí)會(huì)發(fā)生分離突然喪失、樣品保留明顯降低或完全不保留，此現(xiàn)象稱為疏水坍塌。

通用二元梯度高壓制備液相色譜儀GI-3000-12ZB，制備液相色譜儀GI-3000-12ZB是一個(gè)二元梯度高壓液相色譜儀系統(tǒng),由自動(dòng)進(jìn)樣器、高壓恒流泵、柱溫箱、UV紫外檢測(cè)器四單元部分以及功能強(qiáng)大的色譜軟件所組成，所有單元模塊均具有高效液相兼容性，讓所有使用者獲得上佳的性能，經(jīng)濟(jì)的設(shè)備和少的耗材費(fèi)用支出。GI-3000系列提供了各類輸液泵，多種檢測(cè)器和手動(dòng)/自動(dòng)進(jìn)樣器。為用戶提供了多種選擇，從而為用戶的分析提供了各個(gè)方位的解決方案。

武集思儀器設(shè)備有限公司致力于打造世界先進(jìn)水平又適合國(guó)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，致力于為您度身定制系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室整體解決方案，是華中地區(qū)規(guī)模型實(shí)驗(yàn)室服務(wù)一站式供應(yīng)商，已為超過(guò)5000個(gè)國(guó)內(nèi)知名企事業(yè)單位提供專業(yè)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，咨詢熱線：027-85518521，400-0027-510，17720504339。