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高效液相色譜常見的堵和漏

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瀏覽:- 發(fā)布日期:2021-08-12 17:02:36【

高效液相色譜是屬于易學難用的儀器,特別講究 “正確使用” 和經驗。

液相工作者接觸最多的是流動相,流動相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。

液相色譜儀最常見的故障一是堵,二是漏。下面就這兩點分別展開討論。(注:流動相以甲醇為例,色譜柱以C18為例)“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。


液相色譜儀器

 高效液相色譜“堵”的原因之一:配制流動相時細菌污染。

堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,最主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。  

 首先我們要認識到,一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理,直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質,也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除,真正容易引起問題的,是水中的細菌。新制備的純水在室內放置幾天就會長菌,而這些細菌雖然肉眼不可見,卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報廢。

時間過久,濾頭黏附細菌導致泵液不準

 高效液相色譜解決它的方法很簡單,就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦:

(1)最理想的方式當然是購買實驗室專用純水機,既方便又可靠,質量也放心。唯一的缺點就是價格不菲。

(2) 成箱購買市售品牌純凈水,如500ml 一支的怡寶或娃哈哈,這些水的質量足以應付液相色譜的要求。

圖片

這里特別指出一個細節(jié):在絕大多數(shù)書本上,凡談到配制流動相都會談到最后有一個過濾的步驟。

高效液相色譜從使用的實際情況來看有幾點需要注意: 

(1)流動相過濾實際操作時由于不可能做到專瓶專用,容易造成的交叉污染,對于配比復雜的流動相影響更大。所以用完后一定要沖洗干凈。用前不放心的話也可以沖洗下。

(2)流動相過濾經濟成本比較高。買一套過濾裝置要3000多元,且過濾器是比較容易損壞的設備。過濾片成本高,有些進口的一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算,過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。并且在使用過濾片時,有些會造成流動相的二次污染,原因在于不合格的過濾片。

(3)流動相過濾耗費時間長。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用后清洗,晾干的過程,至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。

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