高效液相色譜是屬于易學難用的儀器，特別講究 “正確使用” 和經驗。

液相工作者接觸最多的是流動相，流動相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。

液相色譜儀最常見的故障一是堵，二是漏。下面就這兩點分別展開討論。（注：流動相以甲醇為例，色譜柱以C18為例）“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。

 高效液相色譜“堵”的原因之一：配制流動相時細菌污染。

堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動相里有雜質，雜質的主要來源就是細菌。  

 首先我們要認識到，一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除，真正容易引起問題的，是水中的細菌。新制備的純水在室內放置幾天就會長菌，而這些細菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報廢。

時間過久,濾頭黏附細菌導致泵液不準

 高效液相色譜解決它的方法很簡單，就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦：

（1）最理想的方式當然是購買實驗室專用純水機，既方便又可靠，質量也放心。唯一的缺點就是價格不菲。

（2） 成箱購買市售品牌純凈水，如500ml 一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質量足以應付液相色譜的要求。

圖片

這里特別指出一個細節(jié)：在絕大多數(shù)書本上，凡談到配制流動相都會談到最后有一個過濾的步驟。

高效液相色譜從使用的實際情況來看有幾點需要注意: 

（1）流動相過濾實際操作時由于不可能做到專瓶專用，容易造成的交叉污染，對于配比復雜的流動相影響更大。所以用完后一定要沖洗干凈。用前不放心的話也可以沖洗下。

（2）流動相過濾經濟成本比較高。買一套過濾裝置要3000多元，且過濾器是比較容易損壞的設備。過濾片成本高，有些進口的一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算，過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。并且在使用過濾片時，有些會造成流動相的二次污染，原因在于不合格的過濾片。

（3）流動相過濾耗費時間長。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用后清洗，晾干的過程，至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。

武漢集思儀器設備有限公司致力于打造世界先進水平又適合國內的實驗室設備，致力于為您度身定制系統(tǒng)的實驗室整體解決方案，是華中地區(qū)規(guī)模型實驗室服務一站式供應商，已為超過5000個國內知名企事業(yè)單位提供專業(yè)實驗室儀器設備，咨詢熱線：027-87660421，400-0027-510，17720504339。