對(duì)于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時(shí),用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風(fēng),以便于氣體的交換。
使用其他pH緩沖系統(tǒng)是否不需要二氧化碳培養(yǎng)箱?已經(jīng)發(fā)現(xiàn),由于空氣中二氧化碳濃度低,如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO 3-將被耗盡,這將影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。因此,大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)仍然需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
細(xì)胞培養(yǎng)基中常加入其他pH緩沖體系,如HEPES緩沖體系,以增加pH緩沖容量。HEPES在pH7.2-7.4有很強(qiáng)的緩沖能力。當(dāng)可呼吸的培養(yǎng)容器從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出時(shí),培養(yǎng)液中的碳酸鹽緩沖體系會(huì)因?yàn)榭諝庵卸趸紳舛鹊投プ饔?。此時(shí)HEPES的緩沖體系可以保持pH穩(wěn)定。
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