對(duì)于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時(shí)，用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風(fēng)，以便于氣體的交換。

細(xì)胞培養(yǎng)基中常加入其他pH緩沖體系，如HEPES緩沖體系，以增加pH緩沖容量。HEPES在pH7.2-7.4有很強(qiáng)的緩沖能力。當(dāng)可呼吸的培養(yǎng)容器從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出時(shí)，培養(yǎng)液中的碳酸鹽緩沖體系會(huì)因?yàn)榭諝庵卸趸紳舛鹊投プ饔?。此時(shí)HEPES的緩沖體系可以保持pH穩(wěn)定。

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