倒灌
左手拿接受容器, 右手拿供液容器。
1. 用火燒一下接受容器的開口,并且在火焰旁邊保持一定的角度。
2. 用火燒一下供液容器的開口, 并在火焰上燒1 ~ 2秒,不要燒糊液體。
3. 將供液容器放在距接受容器上方2 英寸處, 并使二者成適當(dāng)?shù)膴A角。
4. 傾斜瓶子并倒出溶液。
5. 倒完后用火分別燒一下兩個(gè)瓶口。
由于倒淮比移液要更容易產(chǎn)生污染, 所以只有在轉(zhuǎn)移大量的溶液時(shí)才使用倒灌這種操作。
過濾除菌
用注射式過濾器過濾少量溶液
材料
一次性0.2 μm 的濾器。
相應(yīng)體積的注射器(1 ml 、2 ml 、5 ml 、10 ml 或20 ml, 50 ml 的注射器徒手操作比較困難),使用滅菌或一次性注射器。
使用無(wú)菌的管子作為接受容器。
試管架。
僅撕開濾器的上包裝,即較粗的一端,可以插在注射器的頂端。
將注射器從包裝中拿出,把推桿抽出,放置在清潔的臺(tái)面。
將注射器頂端的保護(hù)頭拿下,立即插在濾器上,注意不要把濾器拿出包裝,把裝好的裝置放在清潔的臺(tái)面。
將滅菌的管子打開蓋子,放在試管架上。
將濾器從包裝中拿出,放入試管中,拿住注射器,保持豎直狀態(tài)。
將液體倒入注射器中,插回推桿,用力但要慢慢地使液體流經(jīng)濾器后流入試管內(nèi)。
將試管蓋好,做好標(biāo)簽,將注射器丟棄到裝有生物危害的尖利物垃圾箱內(nèi)。
使用杯狀濾器過濾大體積的溶液
材料
一次性0.2 μm 的濾器。
放置濾器的鐵架臺(tái)或架子。
無(wú)菌的試劑瓶用來(lái)裝過濾后的溶液。
真空器,實(shí)驗(yàn)臺(tái)上見到的家用真空泵是最常用的設(shè)備,這種設(shè)備是用水或泵驅(qū)動(dòng)的。
將沖器和真空泵用軟管相連,濾器用夾子固定在架子上,保持豎直和穩(wěn)定。
將溶液倒入濾器,溶液體積大時(shí)可以分批次將液體倒入濾器。
將濾器的蓋子蓋上,緩慢打開真空泵,溶液會(huì)慢慢地從濾器中抽出來(lái)。有些濾器可以配上尤菌的試劑瓶,這樣過濾后的溶液可直接存放在試劑瓶中。
關(guān)閉真空泵,等待一會(huì)。
從濾器上拔下真空泵的管子,立刻將過濾好的液體倒入一個(gè)無(wú)菌的試劑瓶保存。如果容器是過濾裝置的一部分時(shí),只需先把容器的蓋子蓋好。
試劑瓶上做好標(biāo)簽,注明已經(jīng)過濾除菌(FS) ,棄掉濾器。
抽氣操作
使用抽氣移出液體的操作和使用移液器的操作十分類似,同樣要收拾好工作區(qū)間,但要多出一個(gè)容器用來(lái)臨時(shí)放置用過的移液管或吸管。
打開移液管或巴氏管的包裝,安裝一個(gè)到抽氣瓶上。
用左手拿住吸管,插入右手拿的橡皮管中。
用手握住插入橡皮管的吸管部分。
如果是玻璃的吸管用火稍微的燒一下。
打開真空泵。
打開要吸取液體的試管或容器,同樣用右手剩余的兩個(gè)手指夾住蓋子,并把試管或容器保持45℃
用火焰燒一下試管口。
把吸管頭剛好插入液面以下,并隨著液面的下降而下降。
快到底部時(shí),稍微抬起一點(diǎn)吸管,使吸管頭在沉淀上方附近緩慢移動(dòng),直至吸完,但不要碰到沉淀。
將吸管放入事先準(zhǔn)備好的容器,以便處理。
將容器口燒一下,蓋好。
將容器或試管豎直放置,確認(rèn)液體已經(jīng)吸完。
關(guān)閉真空泵,取下吸管。
使用抽氣操作有傳染性的物質(zhì)時(shí),必須在抽濾瓶和真空裝胃之間接上一個(gè)盛水的濾器,可以防止那些物質(zhì)進(jìn)入真空裝置中。當(dāng)真空度降低時(shí),說明濾器已經(jīng)被浸濕,必須更換,所以要事先準(zhǔn)備好備用的濾器。
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