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實(shí)驗(yàn)過程中如何進(jìn)行無(wú)菌操作?

2023-05-23 09:45:10 

倒灌

左手拿接受容器, 右手拿供液容器。

1. 用火燒一下接受容器的開口,并且在火焰旁邊保持一定的角度。

2. 用火燒一下供液容器的開口, 并在火焰上燒1 ~ 2秒,不要燒糊液體。

3. 將供液容器放在距接受容器上方2 英寸處, 并使二者成適當(dāng)?shù)膴A角。

4. 傾斜瓶子并倒出溶液。

5. 倒完后用火分別燒一下兩個(gè)瓶口。

由于倒淮比移液要更容易產(chǎn)生污染, 所以只有在轉(zhuǎn)移大量的溶液時(shí)才使用倒灌這種操作。

過濾除菌

用注射式過濾器過濾少量溶液

材料

一次性0.2 μm 的濾器。

相應(yīng)體積的注射器(1 ml 、2 ml 5 ml 、10 ml 20 ml, 50 ml 的注射器徒手操作比較困難),使用滅菌或一次性注射器。

使用無(wú)菌的管子作為接受容器。

試管架。

僅撕開濾器的上包裝,即較粗的一端,可以插在注射器的頂端。

將注射器從包裝中拿出,把推桿抽出,放置在清潔的臺(tái)面。

將注射器頂端的保護(hù)頭拿下,立即插在濾器上,注意不要把濾器拿出包裝,把裝好的裝置放在清潔的臺(tái)面。

將滅菌的管子打開蓋子,放在試管架上。

將濾器從包裝中拿出,放入試管中,拿住注射器,保持豎直狀態(tài)。

將液體倒入注射器中,插回推桿,用力但要慢慢地使液體流經(jīng)濾器后流入試管內(nèi)。

將試管蓋好,做好標(biāo)簽,將注射器丟棄到裝有生物危害的尖利物垃圾箱內(nèi)。

使用杯狀濾器過濾大體積的溶液

材料

一次性0.2 μm 的濾器。

放置濾器的鐵架臺(tái)或架子。

無(wú)菌的試劑瓶用來(lái)裝過濾后的溶液。

真空器,實(shí)驗(yàn)臺(tái)上見到的家用真空泵是最常用的設(shè)備,這種設(shè)備是用水或泵驅(qū)動(dòng)的。

將沖器和真空泵用軟管相連,濾器用夾子固定在架子上,保持豎直和穩(wěn)定。

將溶液倒入濾器,溶液體積大時(shí)可以分批次將液體倒入濾器。

將濾器的蓋子蓋上,緩慢打開真空泵,溶液會(huì)慢慢地從濾器中抽出來(lái)。有些濾器可以配上尤菌的試劑瓶,這樣過濾后的溶液可直接存放在試劑瓶中。

關(guān)閉真空泵,等待一會(huì)。

從濾器上拔下真空泵的管子,立刻將過濾好的液體倒入一個(gè)無(wú)菌的試劑瓶保存。如果容器是過濾裝置的一部分時(shí),只需先把容器的蓋子蓋好。

試劑瓶上做好標(biāo)簽,注明已經(jīng)過濾除菌(FS) ,棄掉濾器。

抽氣操作

使用抽氣移出液體的操作和使用移液器的操作十分類似,同樣要收拾好工作區(qū)間,但要多出一個(gè)容器用來(lái)臨時(shí)放置用過的移液管或吸管。

打開移液管或巴氏管的包裝,安裝一個(gè)到抽氣瓶上。

用左手拿住吸管,插入右手拿的橡皮管中。

用手握住插入橡皮管的吸管部分。

如果是玻璃的吸管用火稍微的燒一下。

打開真空泵。

打開要吸取液體的試管或容器,同樣用右手剩余的兩個(gè)手指夾住蓋子,并把試管或容器保持45℃

用火焰燒一下試管口。

把吸管頭剛好插入液面以下,并隨著液面的下降而下降。

快到底部時(shí),稍微抬起一點(diǎn)吸管,使吸管頭在沉淀上方附近緩慢移動(dòng),直至吸完,但不要碰到沉淀。

將吸管放入事先準(zhǔn)備好的容器,以便處理。

將容器口燒一下,蓋好。

將容器或試管豎直放置,確認(rèn)液體已經(jīng)吸完。

關(guān)閉真空泵,取下吸管。

使用抽氣操作有傳染性的物質(zhì)時(shí),必須在抽濾瓶和真空裝胃之間接上一個(gè)盛水的濾器,可以防止那些物質(zhì)進(jìn)入真空裝置中。當(dāng)真空度降低時(shí),說明濾器已經(jīng)被浸濕,必須更換,所以要事先準(zhǔn)備好備用的濾器。

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