凝膠成像系統(tǒng)構(gòu)成及選型
實驗室常用到的凝膠成像系統(tǒng)的構(gòu)成有哪些呢?
認識CCD
CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。
CCD又分為:制冷型和非制冷型,在曝光超過5-10秒,CCD芯片就會發(fā)熱,沒有致冷設(shè)備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。
衡量CCD好壞的指標:分辨率,CCD尺寸,動態(tài)范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,CCD感光器件的面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低 。
關(guān)鍵參數(shù)指標
分辨率:和像素相關(guān),像素為CCD能分別的最小的感光元件 ,即為一個點。CCD與像素數(shù)量和像素大小也有關(guān)。
動態(tài)范圍值:動態(tài)范圍表示在一個圖像中最亮與最暗的比值。灰階12(bit)表示在一種表征光亮度的方法 ,動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好。
量子效率:(CCD分為 商業(yè)及、工程級、科研及。)波長越大效率越高。CCD的量子效率也稱像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。
信噪比:化學發(fā)光檢測的時候,需要曝光的時間比較長,這樣導致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對圖像的質(zhì)量影響非常大。需要通過CCD降溫來減少影響
光學鏡頭:光學鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角、標準,遠攝鏡頭;結(jié)構(gòu)上分有固定光圈定焦鏡頭,手動光圈定焦鏡頭,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭、自動變焦鏡頭,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。
濾光鏡片:熒光:gelred、gelgreen、EB、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Red、SYPRO Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、熒光板等
濾光輪
作用:濾掉不需要的光,只讓特定波長的光透過。
DNA分子在紫外光下,會發(fā)出590nm左右的熒光。因此應(yīng)用F590濾光片,就會只讓DNA分子發(fā)出的光透過濾光片被相機檢測到。而紫外透照儀發(fā)出302nm UV不會被相機檢測到。
其他部分
不銹鋼暗室:抗化學腐蝕,密閉
透照臺:一般是抽屜式透照臺,方便進行切膠(透射面積:Xcm X Ycm)
紫外自動防護裝置:開門自動關(guān)閉光源
光源:紫外透射和白光反射,可選配白光透射(紫外/白光轉(zhuǎn)換屏)
05如何選型
1、根據(jù)應(yīng)用范圍:選擇普通凝膠成像或高端應(yīng)用的化學發(fā)光和熒光系列成像系統(tǒng)
2、根據(jù)像素要求選擇:50萬,140萬,200萬,420萬等
3、根據(jù)暗箱類型選擇
4、根據(jù)紫外透射面積選擇
5、根據(jù)鏡頭類型選擇:手動鏡頭,電動鏡頭
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