離心機是DNA提取生物樣品分離的實驗設備,在DNA提取中,高速冷凍離心機發(fā)揮著重要的作用,其中最關鍵的點是溫度控制。以實驗為例,在細胞的細胞核中,DNA與蛋白質(zhì)結合形成染色體,因此提取DNA時既要將蛋白質(zhì)等物質(zhì)除盡,又要盡可能保持DNA分子的完整性,即保持DNA帶不發(fā)生斷裂,無外源核酸污染。
那么溫度對DNA到底有什么影響呢?
答案就是,高溫會造成DNA的變性失活,也就是DNA雙鏈解鏈成為單鏈,但在溫度下降后會恢復為雙鏈形式。
DNA在溶液,尤其是水的稀溶液中,會發(fā)生自然的降解作用。降解作用速率和溫度關系不大,但是反復的凍融會加速DNA的斷裂和降解。
DNA提取除了在司法鑒定中扮演著舉足輕重的角色以外,在基因工程和蛋白質(zhì)工程等分子生物學領域也應用極廣,而樣品分離實驗離不開離心機的性能技術指標與正確使用,比如轉速設定、離心時間、擺放位置等,而其中最關鍵也是容易被忽視的是樣品的溫度控制。
其實不只是DNA提取,如生物制藥或營養(yǎng)物質(zhì)萃取等對生物活性保留要求很苛刻的技術項目,離心的溫度都需要嚴格符合要求,與標準相差幾攝氏度可能就會嚴重影響品質(zhì),若超過溫度區(qū)間范圍會對活性酶的指標有影響或者溫度過低導致凝結,因此選用帶精確溫控的離心機則是重中之重。
需要嚴格溫控的實驗基本上都要求樣品保持在較低的溫度,因此在使用帶冷凍功能的離心機之前需要進行預冷,并進行溫度校準和監(jiān)測溫度波動。
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