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常用的幾種“液相色譜檢測(cè)器”

2022-11-14 17:15:30 

液相色譜檢測(cè)器常用的一般以下幾種:

1、紫外可見檢測(cè)器

紫外可見光檢測(cè)器是應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器,遵循的原理是郎伯比爾定律。

液相色譜儀器

紫外可見檢測(cè)器靈敏度高,線性范圍寬,對(duì)流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫分離。該檢測(cè)器要求被檢測(cè)樣品組分有紫外-可見光吸收,而使用的流動(dòng)相無(wú)吸收,或在被測(cè)組分吸收波長(zhǎng)處無(wú)吸收。一般選擇在待分析物最大吸收波長(zhǎng)處進(jìn)行檢測(cè),以獲得最高靈敏度和抗干擾能力。在沒有最大吸收時(shí),可采用末端吸收。檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇除取決于待測(cè)物質(zhì)的成分和分子結(jié)構(gòu)外,還必須考慮流動(dòng)相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長(zhǎng)下限值,超過這個(gè)波長(zhǎng),溶劑的吸收會(huì)變得很強(qiáng),以至于不能很好地測(cè)出待測(cè)物質(zhì)的吸收強(qiáng)度。

2、光電二極管陣列檢測(cè)器(Photodiode Array Detector)

簡(jiǎn)稱PDA,又稱為二極管陣列檢測(cè)器(DAD)。這種檢測(cè)器以光電二極管陣列作為檢測(cè)元件,可進(jìn)行多通道并行檢測(cè),在一次色譜測(cè)量中,可同時(shí)獲得時(shí)間、波長(zhǎng)、吸光度三者的關(guān)系,通過計(jì)算機(jī)處理,在熒光屏上顯示出三維圖譜,也可作出任意波長(zhǎng)的吸光度-時(shí)間曲線和任意時(shí)間的吸光度-波長(zhǎng)曲線。

3、示差折光檢測(cè)器

示差折光檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器?;谶B續(xù)測(cè)定液相色譜色譜柱流出物光折射率的變化而用于測(cè)定溶質(zhì)濃度,溶液的光折射率是溶劑流動(dòng)相和溶質(zhì)各自的折射率乘以其物質(zhì)的量濃度之和,溶有樣品的流動(dòng)相和流動(dòng)相本身之間光折射率之差即表示樣品在流動(dòng)相中濃度。

原則上,凡是與流動(dòng)相光折射率有差別的樣品都可用它來測(cè)定,其檢測(cè)限可達(dá)(10^-6~10^-7)g/ml。應(yīng)注意的是,選擇溶劑時(shí)必須考慮溶劑的光折射率。但這種檢測(cè)器靈敏度低,對(duì)溫度、流動(dòng)相組成等的變化敏感,而且與梯度洗脫不相容,很大程度地限制了它的應(yīng)用范圍。在藥物分析中,這種檢測(cè)器多用于多糖類、萜類化合物等分子量和含量的測(cè)定。

4、熒光檢測(cè)器(Fluorescence Detector)

熒光檢測(cè)器是基于化合物的光致發(fā)光現(xiàn)象,熒光檢測(cè)器流通池為直角形的試樣池,用石英材料制成。這一檢測(cè)器特別適用于痕量組分和能顯示熒光的物質(zhì)檢測(cè)。這種檢測(cè)器具有極高的靈敏度和良好的選擇性。一般來說,它比紫外吸收檢測(cè)器的靈敏度要高10-1000倍,可達(dá)μg/L級(jí),而且需要的試樣很少,因此在藥物和生化分析中有著廣泛的應(yīng)用。

5、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)

蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是一種新型的通用型質(zhì)量檢測(cè)器,不同于紫外和熒光檢測(cè)器,ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè),不受其官能團(tuán)的影響。ELSD檢測(cè)過程主要分為三個(gè)步驟:首先是霧化過程,用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化;第二步是蒸發(fā)過程,流動(dòng)相在加熱管(漂移管)中蒸發(fā);第三步是檢測(cè),測(cè)定留下來的樣品顆粒的光散射。

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